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本发明公开了一种木聚糖酶突变体及其制备方法与应用,涉及基因工程和遗传工程技术领域。该突变体包括以木聚糖酶HwXyl10A为母本对Gly363位点饱和突变后得到的一种或几种突变体。具体通过定点突变得到了19种突变体,对其进行酵母表达,再通过热稳定新和催化活力筛选,获得2个比活力和热稳定性均显著提高的突变体;本发明通过对Gly363位点的改造可以大大提高木聚糖酶的热稳定新和催化效率,并对第10家族木聚糖酶及其它糖苷水解酶的热稳定性和催化效率改良具有重要的指导意义,还为其在工业生产中的应用提供了基础。