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本发明公开了一种纳米硒化铜(CuSe)作为过氧化物模拟酶测定过氧化氢和L‑半胱氨酸的应用。纳米硒化铜作为过氧化物模拟酶,具有过氧化物酶的活性。本发明首次发现纳米硒化铜具有过氧化物模拟酶的功能,可用于检测过氧化氢的含量;本发明发现L‑半胱氨酸可以抑制纳米硒化铜对于TMB和H2O2的催化氧化反应,可用于检测L‑半胱氨酸的浓度;本发明制备的纳米硒化铜作为催化剂相比于HRP,具有稳定性高,可重复使用,以及高效的过氧化物模拟酶催化活性;本发明发现在无过氧化氢存在下,纳米硒化铜同样可以催化显色剂,作为模拟酶使用;本发明中的制备方法工艺简单,可操作性强,能进一步满足生产和应用。