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一种基于核酸适配体和量子点同时检测链霉素氯霉素四环素三种抗生素残留的方法,属于分析化学技术领域。本发明设计合成了三段互补cDNA1序列,分别与三种抗生素适配体DNA序列互补,同时还与三种抗生素各自的捕获探针DNA序列和互补cDNA2序列部分互补。三种cDNA1首先和各自互补的适配体DNA杂交形成双链DNA,当样品中存在目标抗生素时,适配体DNA优先与其对应的抗生素结合使双链DNA去杂交并释放出cDNA1。游离cDNA1与修饰在金电极表面的捕获探针DNA结合,三种量子点修饰的cDNA2与cDNA1的另一端杂交。金电极表面的三种量子点经酸溶后会产生与目标抗生素对应的溶出伏安峰。利用峰电流值的变化和抗生素浓度之间的关系实现对三种抗生素的检测。该方法具有良好的重复性、稳定性和高灵敏度,可用于对牛奶等样品中的三种抗生素残留进行直接测定。