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本发明提供了一种单宁酸为模板的介孔硅固定化胰蛋白酶的制备方法，包括如下步骤：步骤1、外表面氨丙基三乙氧基硅烷修饰的以单宁酸为模板的介孔硅的制备；步骤2、单宁酸为模板的介孔硅固定化胰蛋白酶的制备。以单宁酸为模板分子合成介孔硅材料。单宁酸廉价环保，且尺寸较大，可以合成具有较大孔径的介孔硅材料。只在介孔硅的外表面接枝APTES，通过静电相互作用使得酶无法固定化于材料外表面，而只能固定化于介孔孔道内，提高了胰蛋白酶的利用效率，使胰蛋白酶可以重复使用。本发明得到的固定化胰蛋白酶活力高，活力回收率高达75.6％，连续操作5次，活力保持在82％以上。
