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本发明提供了一种检测三聚氰胺的电化学生物传感器，包括：Aptamer，Primer，HAP1，血红素，钾离子，过氧化氢，λ‑核酸外切酶和修饰HAP2的金电极。该传感器的反应条件温和，反应速度快；由于使用金电极，其电极简便、小型化、易携带、可多次使用；检测原理的主要过程均是在均相中实现的，提高了反应速度，降低了操作的复杂程度，实现了目标物的快速，简单，灵敏的检测；制备方法简单，性能稳定，电极的重复性好，适用于食品安全中三聚氰胺的检测和生物传感器产业化的实际应用。
