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本发明公开了一种抗CTLA4单域抗体,所述的抗CTLA4单域抗体的可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述的抗CTLA4单域抗体为鲨鱼源抗体。本发明还公开了一种编码所述的抗CTLA4单域抗体的基因,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种重组质粒,所述的重组质粒含有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明还公开了一种重组表达菌,所述的重组表达菌含有所述的重组质粒。本发明制备的抗CTLA4单域抗体对CTLA4有良好的结合活性和抗肿瘤活性,因此,该单域抗体具有良好的应用前景。本发明制备的重组CTLA4单域抗体还具有重组单域抗体的优点。